免疫组化 分子病理 实验服务 免疫组化双染（芯片）免疫组化 分子病理 实验服务 价格￥300单位张货号HKF2026品牌浩克 QQ53383090 咨询购买 产品介绍产品参数资料下载 【产品信息】 产品名称产品货号规格价格免疫组化双染（芯片）HKF2026张300元实验原理免疫组化，是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的研究，称为免疫组织化学技术(IHC)或免疫细胞化学技术(ICC)。 实验步骤1. 石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ12min-二甲苯Ⅱ12min -无水乙醇Ⅰ6min- 95%酒精6min- 85%酒精6min，自来水洗2min。2. 抗原修复：组织切片置于盛满抗原修复液EDTA(9.0)的修复盒中于微波炉内进行抗原修复，中火8min至沸腾停火8min再转中低火7min，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片。自然冷却后将玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。3. 阻断内源性过氧化物酶：切片加上3%的双氧水，室温孵育25min，将玻片置PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。4. 画圈：用组化专用的组化笔沿着组织外围轮廓画一个与组织间隔3-4毫米的小圈，然后加入足量的PBS保证后续依次加入的封闭血清，一抗，二抗，以及显色剂能完全覆盖组织，而不沿着玻片流走。5. 血清封闭:在组化圈内滴加3%BSA 均匀覆盖组织，室温封闭30min。6. 加一抗：轻轻甩掉封闭液，在切片上滴加按一定比例配好的一抗，切片平放于湿盒4°过夜孵育。7. 加二抗：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加与超敏兔鼠通用二抗（HRP标记）覆盖组织，室温孵育50min。8. 显色：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加解冻的TY反应液反应20min，然后PBS洗三次，之后加入红色显色液工作液（PB:CU:红色色原：AC=860:40:1:100），显微镜下控制显色时间，阳性为红色，纯水冲洗切片终止显色。(时间较长15min左右)，再重复2-7的操作步骤。9. 抗原修复：组织切片置于盛满抗原修复液EDTA(9.0)的修复盒中于微波炉内进行抗原修复，中火8min至沸腾停火8min再转中低火7min，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片。自然冷却后将玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。10. 阻断内源性过氧化物酶：切片加上3%的双氧水，室温孵育25min，将玻片置PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。11. 画圈：用组化专用的组化笔沿着组织外围轮廓画一个与组织间隔3-4毫米的小圈，然后加入足量的PBS保证后续依次加入的封闭血清，一抗，二抗，以及显色剂能完全覆盖组织，而不沿着玻片流走。12. 血清封闭:在组化圈内滴加3%BSA 均匀覆盖组织，室温封闭30min。13. 加一抗：轻轻甩掉封闭液，在切片上滴加按一定比例配好的一抗，切片平放于湿盒4°过夜孵育。14. 加二抗：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加与超敏兔鼠通用二抗（HRP标记）覆盖组织，室温孵育50min。15. DAB显色：玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加（稀释液和浓缩液1000:50配制）新鲜配制的DAB显色液，显微镜下控制显色时间，阳性为棕黄色，纯水冲洗切片终止显色。16. 复染细胞核：苏木素染色2-3mins左右，自来水洗，苏木素分化液分化2秒，自来水冲洗，苏木素返蓝液返蓝15-30s，流水冲洗。17. 脱水封片：将切片依次放入75%酒精5min-85%酒精5min -95%酒精5min -无水乙醇5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min 中脱水透明，将切片从二甲苯拿出来稍晾干，中性树胶封片。18. 显微镜镜检，图像采集分析。结果判读：苏木素染出细胞核为蓝色，DAB显出的阳性表达为棕黄色，红色显色试剂呈粉红色注意事项：1．注意切片脱蜡是否彻底；2．实验过程中切片勿干片；3. 实验操作中小心枪头挂伤组织。 无 暂无 说明文档下载说明书.pdf 上一篇: IF+TUNEL双染下一篇: IHC+普鲁士蓝（或其他化学染料） 推荐 原位杂交（FISH双标和抗体共染） 2025年6月19日 2327 服务介绍： 原位杂交原理：原位杂交是指将特定标记的已知序列核酸为探针与细胞或组织切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进... 查看全文 研磨 2024年11月29日 1338 服务介绍： 无 暂无 查看全文 免疫荧光四标扫描（芯片） 2024年9月6日 1273 【产品信息】 组织芯片免疫荧光染色,是将许多不同处理的组织以规则的微阵列方式排列于同一载体上，同时进行相同指标的免疫荧光检测。 送样运... 查看全文 芯片四标正式实验染色 2023年7月5日 1441 无 暂无 查看全文
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